产品信息

产品描述

MolPure^® Magnetic Residual DNA Sample Preparation Kit适用于生物制品样本中残留DNA检测的前处理。采用独特的磁珠和精心优化的缓冲体系，可最大限度的分离纯化样本中的微量宿主DNA。

该前处理试剂盒可与多种宿主残留qPCR检测试剂盒配合使用，包括CHO细胞残留DNA检测试剂盒（Cat#41301）、HEK293细胞残留DNA检测试剂盒（Cat#41302）、Vero细胞残留DNA检测试剂盒（Cat#41303）和E.coli残留DNA检测试剂盒（Cat#41304）。

产品组分

运输和保存方法

Part I组分室温运输，4℃可保存1年，长期保存于-20℃。

Part II组分室温运输，室温保存，有效期1年。

Part Ⅲ 组分冰袋运输，-20℃保存1年。

注意事项

1）注意观察常温保存溶液是否有析出或浑浊（尤其冬季等室温为低温环境时），可37℃水浴至溶液澄清，避免影响使用效果。

2）洗脱时可能存在磁珠残留，吸取样本时应尽量避免吸入磁珠。

3）处理样本及加样时，勤换枪头，避免交叉污染。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

5）本产品仅作科研用途！

实验前准备

1. 自备设备和试剂：磁性分离架、杭州奥盛Auto-Pure32A核酸提取仪或其他全自动化提取仪，水浴锅或金属浴，漩涡振荡器，1.5 mL离心管，无水乙醇等。

2. 首次使用前，在洗涤液A^*和洗涤液B*瓶中加入标签注明体积的无水乙醇，充分混匀后使用，并做好标记。每次使用后将瓶盖盖紧，以保持瓶中的乙醇含量。

一、手工提取操作方法

1. 样本处理

a. 待测样本为疫苗等本身含有较高的DNA含量的样本，可用1×PBS（pH=7.4）对样本进行适当比例稀释后提取（为了保证检测的准确性，使样本的检测值在标准曲线线性范围之内，通常可考虑进行100倍稀释）。

b. 待测样本为干粉的，可用ddH₂O将样本稀释成10 mg/mL或者100 mg/mL后使用。

2. 取100 μL样本装于1.5 mL离心管中，加入100 μL裂解液，10 μL蛋白酶K，涡旋混匀10秒。

注意：样本蛋白浓度0-100 mg/mL，蛋白酶K用量为10 μL，样本蛋白浓度100-200 mg/mL，蛋白酶K用量为20 μL。

3. 60℃孵育20 min。

4. 孵育完成后，加入400 μL结合液、6 μL糖原、9 μL Poly A钾盐涡旋混匀。  

5. 加入20 μL磁珠，涡旋混匀后，放置10分钟，每隔3分钟涡旋混匀10秒。

注意：磁珠使用前需涡旋混匀，保证磁珠彻底重悬。在一次性加样4-5次后，建议再次混匀后再行加样。

6. 短暂离心后，将离心管置于磁力架上静置1-2分钟，待磁珠完全吸附，小心吸取液体。

7. 加入500 μL 洗涤液A（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），振荡或涡旋混匀，确保磁珠分散，离心管壁无聚集磁珠。

8. 短暂离心后，将离心管置于磁力架上静置1-2分钟，待磁珠完全吸附，小心吸取液体。

9. 加入500 μL 洗涤液B（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），振荡或涡旋混匀，确保磁珠分散，离心管壁无聚集磁珠。

10. 短暂离心后，将离心管置于磁力架上静置1-2 min，待磁珠完全吸附，小心吸取液体。

11. 为保证尽量吸出残留乙醇，可将离心管快速离心10 s后，置于磁力架上用10 μL移液器吸出残留乙醇。

12. 打开管盖，室温放置3 min直至乙醇挥发完。观察到磁珠表面无反光或出现裂隙即表明乙醇已挥发完全。

13. 将离心管从磁力架上取下，加入50-100 μL 70℃预热的洗脱液，振荡混匀，短暂离心后，70℃孵育5 min，期间可振荡混匀1次。

14. 短暂离心后，将离心管放置于磁力架上静置2 min，待磁珠完全吸附，小心将DNA溶液转移至新的离心管中，保存于-20℃，长期保存需放置于-80℃。