神经干细胞群内的微脉管系统促进其自我更新并调节谱系发展。前期研究表明内皮细胞产生的可溶性因子是神经祖细胞(NPC)命运和增殖的关键调节者;但内皮细胞对局部血流动力敏感,且这个重要生理过程的作用还没有确定。伦斯勒理工学院生物技术和多学科研究中心的Deanna Thompson博士团队评估了成体小鼠神经祖细胞对从静态或动态(流动)内皮细胞培养中分离出来的可溶性因子的反应。在动态条件下产生的内皮因子明显增加神经元分化,而静态条件下释放的因子刺激少突胶质细胞分化。流动条件增加内皮细胞神经性因子和硫酸肝素粘多糖的释放,其可以增加它们的生物活性,可能是增强神经元分化的基础。此外,内皮因子,特别是静态条件下的内皮因子,促进贴壁生长。同时,他们的数据表明血流量可能影响增殖、贴壁和成体神经祖细胞神经元-神经胶质命运的选择,启示减少血流量的疾病和老化形成。
内皮细胞培养中不同的细胞因子表达分析(D:动态;S:静态)
主要实验方法:
1. 内皮细胞染色和成像(鬼笔环肽、Hoechst 33342)
2. Caspase比色测定(caspase colorimetric assay kit)
3. 神经祖细胞分离和培养(N2 supplement、N21 supplement、FGF2、EGF)
4. 细胞因子水平分析(ELISA/Luminex)