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上新 | Vaccinia Capping System新品试剂盒上线,便捷客户使用!

作者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司 2024-01-19T00:00 (访问量:42532)

 

mRNA药物是通过将编码抗原蛋白的mRNA接种到人体,利用人体细胞内的遗传物质进行表达合成抗原蛋白,通过抗原蛋白诱导和激活机体的免疫系统产生免疫反应,从而达到预防和治疗疾病的目的。mRNA药物以安全、高效、周期短等的优势,能够同时诱导产生体液免疫和细胞免疫,目前已经应用在肿瘤、传染病、罕见病、心血管疾病等多种不同适应症。

 

在mRNA药物的研究中,合成的mRNA需要在体内完成翻译,加帽和加尾至关重要,可以有效防止降解并促进其在真核细胞中的的翻译。在mRNA体外合成过程中,目前可通过两种方式完成mRNA 5’末端的加帽:一种是使用加帽酶进行转录后加帽,另一种是使用帽结构类似物进行共转录加帽。

 

 

 

酶法加帽

 

常用的是牛痘病毒加帽系统,该系统包含RNA三磷酸酶、鸟嘌呤甲基转移酶及鸟嘌呤转移酶、甲基供体SAM、GTP和反应buffer。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子结构的有效酶,其由D1和D12两个亚基组成,兼具RNA三磷酸酯酶活性(TPase)、鸟苷酰基转移酶活性(GTase)和鸟嘌呤甲基转移酶活性(N7 MTase)。牛痘病毒加帽酶参与作用下的mRNA加帽过程如下图1所示,在mRNA 5'端添加一个7-甲基鸟嘌呤帽结构(m7Gppp),即为Cap0(图2)。

 

mRNA +1位核苷酸的核糖2’位羟基也可以甲基化,产物称为Cap1,人类的mRNA都具有Cap1结构。Cap1不仅与翻译起始有关,在针对外源RNA的先天免疫系统中,还可作为自身RNA的标志。2-O-甲基转移酶可以在mRNA +1位核苷酸的2´-OH位置处添加一个甲基基团,最终形成最有Cap1结构的mRNA(图3)。

 

共转录加帽

 

在体外转录反应体系中同时添加帽类似物,可实现一步法加帽,简化了工艺流程。目前常用的帽类似物为Cap1帽类似物,加帽率可达到95%以上。Cap1的帽子结构和天然帽子结构一致,免疫原性低,并且转录产物的产量比较高,逐渐成为新一代的加帽技术。

翌圣生物推出Vaccinia Capping System产品,主要应用于RNA体外转录之后加帽,形成具有Cap1帽子结构的mRNA

 

 

 

产品性能

 

加帽率高:加帽率可高达99%;
产品稳定性强:批次差异CV<5%;
适用性强:加帽的mRNA可应用于多种场景;
操作简单:两步法加帽需要的牛痘病毒加帽酶等物料均包含在试剂盒里。

 

 

 

产品数据

  加帽率数据  

分别对2K 和4K的片段参照说明书进行操作,使用LC-MS进行加帽率检测,加帽率都在99%以上。

 

 批次稳定性数据  

对4K 片段分别进行批次间的稳定性验证,批次间的CV<5%, 加帽率也均在99%以上。

 

 

 完整度高  

采用CE的方法分别对2K、4K的片段进行完整度检测,完整度均>92%。

 

 

 

 

产品列表

 

产品名称

货号

规格

Vaccinia Capping System

17121ES50/60/70

50T/100T/500T

 

 

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产品名称

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